rhTNF—a联合bcl—2反义寡核苷酸对急性髓细胞白血病细胞株HL—60增殖与凋亡的作用

目的 探讨基因重组人类肿瘤坏死因子a（rhTNF-a）和bcl－2反义寡核苷酸（ASPO）对HL－60细胞增殖与凋亡的作用，进一步认识肿瘤坏死因子a（rhTNF-a）和bcl－2两者调控肿瘤细胞凋亡的作用及相互联系。方法 单独和联合应用rhTNF-a和bcl－2ASPO处理HL－60细胞，通过MTT法检测HL－60细胞生长和存活特性变化；原位细胞凋亡检测和流式细胞技术检测细胞凋亡；应用RT－PCR、免疫组织化学检测癌基因bcl－2表达的改变。结果 rhTNF-a和bcl－2ASPO的联合应用明显增强对HL－60细胞的增殖抑制；细胞凋亡率明显升高；癌基因bcl－2在mRNA和蛋白表达明显下降。结论 TNF和bcl－2ASPO在诱导HL－60细胞凋亡中可能存在协同作用，为血液肿瘤的联合治疗提供了新的途径。     

白血病和正常血细胞的一些细胞因子及受体表达的比较研究

目的:研究白血病细胞和正常血细胞的细胞因子及相应受体(R)的表达及其意义。方法:采用逆转录-聚合酶链反应方法检测红白血病细胞系(HEL、K562)、髓系白血病细胞系(HL-60)、单核细胞白血病细胞系(U937)、巨核细胞白血病细胞系(DAMI、MEG-01)、T淋巴瘤细胞系(HUT78)及EB病毒感染的B细胞系(CA)和正常血细胞(CD34⁺造血干细胞、外周血单个核细胞、成熟粒细胞、巨核细胞及血小板)的多种细胞因子及受体的表达。结果:①CD34⁺造血干细胞同时表达IL-1(α、β)、IL-3、IL-6、GM-CSF、G-CSF及相应受体和干细胞因子受体(SCFR)、血小板生成素受体(MPL)基因,在成熟粒细胞仅表达IL-6、IL-6R、G-CSFR、GM-CSF,巨核细胞、血小板仅表达IL-3R、IL-6、IL-6R、MPL。而TGFβ₁、TNFα及相应受体在上述正常血细胞均有持续表达。②HEL、K562、HL-60、U937、DAMI、MEG-01、HUT78及CA可同时表达至少两种以上正调控因子及相应受体,而负调控因子TGFβ₁、TNFα及受体在上述各细胞系均有表达。结论:白血病细胞株细胞存在正性多自泌环节,白血病细胞的正、负自分泌因子失衡与白血病发病有重要关系。     

Bcl-2基因和肿瘤细胞耐药的研究

肿瘤细胞耐药严重影响化疗效果和肿瘤预后 ,是肿瘤治疗的重要障碍。肿瘤细胞耐药存在多种机制 ,并在不同阶段启动 ,使细胞在恶劣环境中的生存能力增强。实验表明 ,许多化疗药物通过诱导或强化肿瘤细胞凋亡发挥抗肿瘤作用 ,因此细胞的凋亡抑制能够促进肿瘤细胞生存并对化疗药物产生耐受 [1] 。 Bcl- 2是最受关注的抑制细胞凋亡的基因 ,它的高表达可阻断多种因素诱导的细胞凋亡 ,使细胞对放化疗耐受 ,被认为是一种新型的耐药基因 [2 ]。1　Bcl- 2基因及其蛋白Bcl- 2是 1 985年 Tsujimoto在研究人滤泡性非霍奇金淋巴瘤染色体 t( 1 4;1 8)易位…     

烷化溶血磷脂与自体骨髓体外净化

<正>烷化溶血磷脂(alkyl-lysophospholipid,ALP)是一种醚脂(ether lipid,EL),其化学结构与溶血磷脂血磷脂酰胆碱(lysophosphatidyl choline,LPC)相似。ALP的化学特性是:甘油骨架的sn-1位与sn-2位有代谢稳定的醚键相连;sn-1位为长链烷基,sn-2位为短链烷基,sn-3位为磷酸胆碱。ALP分子结构稳定,只能被O-烷基裂解酶(O-alkyl cleavage enzyme,OAC酶)所代谢。ALP家族具有选择性抗肿瘤作用,ET-18-OCH_3为该家族中研     

Bcl-2硫代反义核酸(G3139)OPC纯化方法

目的 建立Bcl-2硫代反义核酸(G3139)OPC纯化方法。方法 将G3139从合成柱上解离并去保护，用OPC柱分离纯化化学合成的G3139。紫外分光光度计测OD值，20％PAGE鉴定其纯度。结果 经OPC柱纯化后G3139制备量可达mg水平，回收率为66％，电泳结果显示为一条亮带。结论 Bcl-2硫代反义核酸OPC纯化法是一种高效、快速、简便的方法。     

联合新型Bcl-2反义核酸与足叶乙苷抑制人小细胞肺癌细胞的增殖

目的　研究一种新型Bcl 2反义寡核苷酸 F95 1在与足叶乙苷 (VP16 )联合使用时 ,对人小细胞肺癌细胞增殖的影响。方法　分别单独及联合应用F95 1、VP16于人小细胞肺癌细胞株NCI H4 4 6 ,通过MTT法检测细胞存活率 ,通过集落形成法检测集落生存率 ,按Welander法计算联合应用组的预测值 ,通过实测值与预测值的比较进行效应分析。结果　细胞存活率 (MTT法 )和集落生存率 (集落形成法 )均显示联合应用F95 1、VP16组的实测值明显低于预测值。结论　联合应用F95 1与VP16对人小细胞肺癌细胞的增殖有协同的抑制作用。     

雷公藤内酯醇联合高三尖杉酯碱对KG-1α细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨低浓度雷公藤内酯醇(triptolide,TPL)联合高三尖杉酯碱(homoharringtonine,HHT)对KG-1α细胞增殖与凋亡的影响及其可能机制。方法:应用CCK-8法检测不同浓度TPL和HHT单用及联用对KG-1α细胞增殖的影响,并计算其药物联合作用指数(combined index,CI);甲基纤维素集落形成实验检测细胞集落形成能力;流式细胞术检测细胞表面分子、细胞凋亡率及细胞周期变化;Western blot检测Akt信号通路相关蛋白在TPL及HHT作用前后的表达情况。结果:KG-1α细胞高表达CD34CD123而CD38缺失;TPL及HHT单用对KG-1α细胞增殖抑制并具剂量依赖性(r=0.952,r=0.992);低浓度联合用药与单药对比,前者细胞增殖、集落形成率更低,而细胞凋亡率增高;CI值亦提示低浓度TPL联合HHT呈高度协同作用。低浓度TPL联合HHT作用KG-1α细胞后,P-Akt~(Ser473)、P-Akt~(Thr308)、BCL-2、PARP及Survivin蛋白表达降低而PARP裂解增加。结论:低浓度TPL联合HHT可通过PI3K/Akt信号通路及下游蛋白协同抑制KG-1α细胞增殖,并诱导其凋亡。     

认识遗传学异常在急性髓细胞白血病预后评估中的价值

急性髓细胞白血病(AML)作为造血干细胞的恶性克隆性疾病,是成人白血病最常见的类型之一.该病各亚型临床表现相似,但却具有各自独特的形态学、免疫表型及细胞遗传学特征,是一个具有完全不同生物学本质的异质性群体.目前,急性白血病发病率逐年上升,尽管随着诊治方案的不断改进,其疗效有了显著提高,但仍有部分AML患者远期疗效极不理想.